^

Здоровье

Конфокальная микроскопия

, медицинский редактор
Последняя редакция: 11.04.2020
Fact-checked
х

Весь контент iLive проверяется медицинскими экспертами, чтобы обеспечить максимально возможную точность и соответствие фактам.

У нас есть строгие правила по выбору источников информации и мы ссылаемся только на авторитетные сайты, академические исследовательские институты и, по возможности, доказанные медицинские исследования. Обратите внимание, что цифры в скобках ([1], [2] и т. д.) являются интерактивными ссылками на такие исследования.

Если вы считаете, что какой-либо из наших материалов является неточным, устаревшим или иным образом сомнительным, выберите его и нажмите Ctrl + Enter.

Конфокальная микроскопия сегодня считается одним из наиболее перспективных методов визуализации кожи in vivo, поэтому интерес к нему как среди клиницистов, так и среди представителей научно-исследовательских институтов необычайно высок.

trusted-source[1], [2], [3], [4], [5]

Возможности конфокальной микроскопии

В дерматологии конфокальную лазерную микроскопию используют для:

  • изучения пенетрации соединений в кожу (путей проникновения, кинетики, распределения в коже);
  • наблюдения за работой желез (определение активного и пассивного состояния);
  • исследования микроциркуляторного русла (в том числе и в режиме реального времени);
  • диагностики новообразований.

Не обсуждая достоинства и недостатки указанных выше разновидностей конфокальной микроскопии, отметим, что в последние годы все бoльшую популярность завоевывает флуоресцентная лазерная конфокальная микроскопия.

trusted-source[6], [7], [8], [9],

Конфокальная микроскопия для исследования кожи

Конфокальный микроскоп дает две неоценимые возможности - исследование тканей на клеточном уровне в состоянии физиологической жизнедеятельности и демонстрации результатов исследования (т. е. клеточной активности) в четырех измерениях - высота, ширина, глубина и время. Для качества изображения и глубины исследования наиболее важную роль играет способность ткани к пропусканию света, иначе говоря, ее прозрачность. Метод конфокальной микроскопии - бесконтактный, луч света не приносит никакого вреда или дискомфорта обследуемому пациенту или экспериментальному животному.

Для исследования кожи используют конфокальную сканирующую лазерную микроскопию (confocal scanning laser microscopy, CSLM). Метод позволяет увидеть эпидермис и сосочковый слой дермы с разрешением, приближенным к гистологическому. Все результаты обследования отображаются на мониторе и сохраняются в виде пакета файлов с изображениями (в виде микрофильма (в динамике) или микрофотографий).

Имеется две разновидности метода:

  • отражательная (reflectance CSLM) - основана на том, что различные внутриклеточные и межклеточные структуры имеют разный индекс преломления света, что позволяет получать контрастное изображение.
  • флуоресцентная (fluorescence CSLM) - использует лазерный свет, проникающий в кожу и возбуждающий в ней экзо- или эндохромофоры, которые в ответ начинают излучать фотоны (т. е. флуоресцировать).

Латеральное разрешение - минимальное расстояние между точками, расположенными на горизонтальной плоскости, т.е. плоскости, параллельной поверхности кожи. Аксиальное разрешение - минимальное расстояние между точками, расположенными на плоскости, перпендикулярной поверхности кожи.

trusted-source[10], [11], [12], [13], [14], [15], [16], [17], [18]

История конфокальной микроскопии

Идея создания микроскопа, способного на клеточном уровне показать прижизненный срез живой ткани, активно разрабатывалась еще 130 лет назад. Основной элемент современных микроскопов был сконструирован в конце XIX века и представлял собой вращающийся диск с мельчайшими отверстиями, расположенными по спирали. Этот диск был изобретен в 1883 г. немецким студентом Паулем Нипковым, в честь которого и получил свое название - диск Нипкова (или нипков-диск). Изобретение было основано на способности света, проходя через мельчайшие отверстия в диске и увеличительную линзу, проникать в глубину ткани и освещать фрагмент клетки на удалении от поверхности. При быстром вращении диска фрагменты складываются в общую картинку. За счет удаления или приближения конструкции к объекту можно варьировать глубину оптического среза исследуемой ткани.

Только с появлением видеомагнитофонов в 1980-х и компьютеров, способных обрабатывать изображения, в начале 1990-х годов появилась реальная возможность создать и эффективно применить те современные микроскопы, которые используются в наше время.


Сообщите нам об ошибке в этом тексте:
Просто нажмите кнопку "Отправить отчет" для отправки нам уведомления. Так же Вы можете добавить комментарий.